家蠶非滯育紅卵突變體Re-nd突變基因的定位克隆

【摘要】：[目的]家蠶Bombyx mori非滯育紅卵突變體Re-nd是唯一在非滯育狀態下卵色呈現鮮紅色的突變品種。本研究通過基因連鎖分析和定位克隆的方法確定Re-nd的突變基因所在的染色體及緊密連鎖位置,為后續Re-nd的功能研究及應用奠定基礎。[方法]以家蠶卵色突變體Re-nd和野生型大造進行雜交,配制連鎖分析群體材料和定位克隆群體材料;針對家蠶全染色體進行SNP標記開發,利用BC_1代群體材料進行連鎖分析,確定Re-nd的突變基因所在的染色體;針對定位的Rend的突變基因所在染色體進行SNP標記開發,利用BC_1群體材料對Re-nd的突變基因進行定位克隆。[結果]連鎖分析結果顯示Re-nd的突變表型與第6號染色體上的SNP標記完全連鎖;初步定位克隆結果顯示Re-nd的突變基因位于SNP標記SNP7和SNP17之間,物理距離4.04 Mb;以SNP7和SNP17之間篩選出的6個SNP標記和25個重組個體進行精細定位克隆,結果顯示Re-nd的突變基因所在的區域位于SNP10到SNP12兩個SNP標記之間的nscaf2853上,物理距離949.3 kb左右。[結論]將Re-nd的突變基因定位于第6號染色體的2個SNP標記SNP10到SNP12之間,物理距離約949.3 kb。本研究為后續Re-nd突變基因的精細定位及功能應用研究奠定了基礎。